干货分享 制备高值白细胞的小技巧

  在血细胞分析仪使用的过程中,为了能够更好的保证测试结果的准确性和可靠性,我们往往要进行一系列的比对测试。依据《临床血液学检验常规项目分析质量发展要求》(WS/T 406-2012)中5.8.2验证方法条款,血常规诊断设备必须至少以20个临床样本做周期性的结果比对。其中要求在这20个临床样本中,白细胞(WBC)浓度超过50.1×109/L的样本占比达到10%,即需要预备2个高值样本。

  然而在现实操作中,某些专科医院在平日工作中很少遇到白细胞浓度超过20.0×109/L的样本,更别提浓度超过50.1×109/L的高值样本。那么是否有方便且有效的方法自己制备符合浓度范围的样本呢?下述为笔者在日常工作中对于高值WBC样本制备的经验分享,供同行参考。

  收集20名健康体检人员EDTA抗凝血液样本,将这20个血液样本放入离心机内,转速设置为3000r/min,离心10分钟。

  用1mL吸管将所有样本中的白膜层细胞吸入新的5mL EDTA抗凝采血管中,当血液样本总量积累约5mL时,封住管帽,再次放入离心机,3000r/min离心10分钟。

  离心后,尽可能多地吸弃上层血浆,并从采血管一侧迅速插入底部,吸去一半的红细胞(RBC)层,此时无需担心吸取到白细胞。

  继续将未转移样本中的白膜层细胞移入此采血管,直到所有20管血液全部转移完成。

  再次放入3000r/min的离心机中离心10分钟,尽可能去除血浆,按前述方法吸弃红细胞,确保管中血液约为2mL混匀后进行检测。

  经过笔者多次试验,此时的白细胞浓度应达到(55~60)×109/L(若白细胞浓度未超过50,请重复离心并弃去红细胞层操作)。

  在得到高值白细胞后,笔者考虑是不是存在更便捷的制备方法?因此,我进行了另一种方法的验证。

  先准备一个50mL的离心管,将20管血液样本全部倒入(即使有部分血液附在采血管上,也不影响我们得到高值白细胞),将50mL离心管置于离心机中,3000r/min离心10分钟,此时吸取的白膜层细胞能直接达到我们要求的浓度,不有必要进行多次离心弃血浆和红细胞的操作,但需注意的是,不要将脂血样本纳入20管样本中,否则会遮挡视线,影响我们吸取白膜层细胞。

  在使用第二种方法得到高值白细胞后,笔者又考虑到部分实验室可能没50mL离心管及相应离心机,那么我们是不是可以用12mL的尿液采集管来替代呢?

  对此,我再次进行了试验,首先还是准备20份血液样本,将血液转移至尿液采集管中,然后按照相同的条件进行离心。将所有管中的白膜层细胞转移到EDTA抗凝采血管中,混匀后检测浓度。但通常首次检测的浓度无法达到50.1×109/L,需要再次对采血管进行离心后去除血浆及部分红细胞,这样我们也能得到高值白细胞。

  通过多次实验我们得知,不同血型的样本混合会导致溶血现象,但这并不影响白细胞的测定。将EDTA抗凝采血管中的血液转移到不含抗凝剂的离心管中,也未发现对结果造成影响的凝集现象。其次,使用尿液采集管的操作复杂性介于使用采血管与50mL离心管之间,我们大家可以根据实际情况选择合适的方法。

  笔者的目的是希望基层实验室能通过有限的条件得到符合要求的高值白细胞,用来保证结果的准确性和可靠性,所以仅使用了实验室最基本的耗材,如果其他专家有更可靠、简便的方法,欢迎进行讨论。